宏虹分享|微流控液滴生成系統完整指南:實驗操作流程、液滴參數優化與常見問題解析(下)

前言

上篇文章中,我們已為您介紹微流控液滴生成的核心原理與系統組成。本篇將進一步聚焦於實務應用層面,分享更具操作性的標準化實驗流程,並同步整理常見問題排除方法與參數優化建議,協助研究人員快速建立穩定且可重現的液滴生成流程。

本方案結合宏虹 Elveflow 微流控液滴生成套件與 Microfluidic ChipShop 微流控晶片,即使不具備微流控領域的專業背景,也能透過標準化操作流程完成系統建置與實驗導入。

透過精準的壓力/流量控制與完整的參數調整機制,可穩定實現油包水(W/O)單分散液滴的生成、尺寸控制與條件優化,並可廣泛應用於生物醫學、材料合成、高通量篩選等多元研究情境。

01 宏虹 Elveflow 微流控系統

標準化實驗流程

本流程完整遵循 Elveflow 官方操作規範,依序涵蓋實驗前準備、系統建置與校正、液滴生成與控制,以及實驗後清潔四大步驟。整體操作簡單,適合作為微流控液滴生成實驗的標準流程參考。

實驗前準備

軟體安裝

於電腦安裝 Elveflow ESI 控制軟體,並參考官方教學完成基礎設定,同時下載各設備使用者指南備用。

試劑配置

水相(分散相)可使用超純水或實驗用緩衝液,建議先以 0.22 μm 濾膜過濾,避免顆粒阻塞晶片。 油相(連續相)可直接使用套件配置的 FluoSurf 2% in HFE-7500;若需調整濃度,可依液滴穩定性需求稀釋至 0.5%–2%。

注意:所有試劑需於通風櫥內操作,避免長時間暴露於空氣中造成污染;儲液容器也應加蓋密封。

設備檢查

檢查所有管路與連接器是否完整無損,確認晶片無刮痕或阻塞,同時確認流量感測器與壓力控制器表面乾淨無污染。

系統建置與設備校正

硬體連接

依照「儲液容器 → 流量感測器 → 流體阻力元件 → Mini Luer 接頭 → MCS 晶片 → 收集裝置」的順序完成管路連接,並確認各模組方向與接口位置正確。

關鍵要求

流體阻力元件需安裝於流量感測器下游,以提升流量控制穩定性。同時,所有接頭皆需確實鎖緊,避免實驗過程中發生滲漏。

微流控液滴生成系統連接示意圖
全系統連接示意圖|點擊圖片可開啟大圖
管路與微流控晶片連接實拍圖
管路與晶片連接實拍圖|點擊圖片可開啟大圖

流量感測器校正

於 Elveflow ESI 軟體中新增並校正 MFS-2+ 感測器。油相建議選擇 Isopropyl 作為校正參考,水相則選擇 Water 作為校正參考,以確保流量讀值準確。

提醒:若使用非標準油相或不同濃度表面活性劑,建議依實際液體特性重新確認校正參數,以降低流量讀值誤差。
Elveflow ESI 油相校正參數設定畫面
油相校正參數|點擊圖片可開啟大圖
液滴生成與精準控制

壓力模式填充與排泡

先以壓力模式注入油相與水相,並耐心排除管路與晶片內的所有氣泡。氣泡是影響液滴穩定性的主要因素之一,因此需確認完全排泡後,再進行下一步操作。

注意:可先將管路填滿液體後再連接晶片,以縮短填充與排泡時間。出口管路需浸入收集液中,避免前液影響流量穩定性。

流量模式切換與參數調整

在 Elveflow ESI 軟體中切換至 Sensor(流量模式),並設定建議的 PI 參數(P = 0.01,I = 0.005),以維持流量穩定。初始建議流量可設定為水相 1 μL/min、油相 50 μL/min,並透過顯微鏡觀察液滴生成狀態。接著可依目標粒徑與生成頻率,微調油相與水相流量,完成精準的液滴參數控制。

注意:在流量模式下,若需調整 PI 參數,建議先切回壓力模式,完成調整後再切回流量模式,以避免出現流量溢流或瞬間波動。
Elveflow ESI 軟體流量控制畫面
如何在 ESI 軟體中由壓力控制切換至流量控制|點擊圖片可開啟大圖
實驗後清潔與設備維護

完成實驗後的必要維護流程

實驗結束後,建議立即進行系統清潔與設備整理,以降低殘留造成的流路阻塞風險,同時延長設備與耗材使用壽命。
晶片清潔

以異丙醇(IPA)沖洗晶片流道。

管路維護

清除殘留試劑並保持管路乾燥。

設備乾燥

使用壓縮空氣吹乾感測器與元件。

維護提醒: 若未及時清潔,殘留試劑可能造成流道阻塞、流量讀值異常或設備壽命下降。建議每次實驗完成後皆執行標準清潔流程。
02

液滴粒徑/頻率精準參數指南

MCS Fluidic 440(50–80 μm)與 Fluidic 947(10–40 μm)晶片具備不同噴嘴尺寸,可對應不同的油相與水相流量參數。一般而言,液滴粒徑會隨水相流量增加而變大,生成頻率則會隨油相流量增加而提高。以下為官方實測核心參數,適用於 CV < 3% 的單分散液滴生成條件,可作為實驗設定參考。

1. MCS Fluidic 440 晶片核心參數

噴嘴尺寸水相流量
(μL/min)
油相流量
(μL/min)
液滴粒徑
(μm)
生成頻率
(Hz)
80 μm0.4508313
70 μm0.6527343
60 μm0.5506269
50 μm1.0505281
參數提醒: 實際液滴粒徑與生成頻率仍可能受到試劑性質、表面活性劑濃度、管路阻抗與環境條件影響。建議以表格參數作為初始條件,再依顯微鏡觀察結果進行微調。

Fluidic 440 詳細參數地圖

Fluidic 440 晶片包含 4 種噴嘴尺寸,可依不同水相與油相流量組合,對應不同液滴粒徑與生成頻率。以下參數地圖可作為實驗條件微調時的參考。
Fluidic 440 80 μm 噴嘴參數表

Design #1–#2|80 μm nozzle(CV < 2%)

Fluidic 440 70 μm 噴嘴參數表

Design #3–#4|70 μm nozzle(CV < 2%)

Fluidic 440 60 μm 噴嘴參數表

Design #5–#6|60 μm nozzle(CV < 2%)

Fluidic 440 50 μm 噴嘴參數表

Design #7–#8|50 μm nozzle(CV < 2%)

點擊圖片可開啟大圖查看詳細參數。建議先依據目標液滴粒徑選擇對應噴嘴尺寸,再參考表格中的水相/油相流量組合進行初始設定。實際實驗時,仍需搭配顯微鏡觀察結果微調參數。

2. MCS Fluidic 947 晶片核心參數

噴嘴尺寸水相流量
(μL/min)
油相流量
(μL/min)
液滴粒徑
(μm)
生成頻率
(Hz)
性能表現
30 μm 0.5 50 30 109 CV < 1.5%
20 μm 0.5 60 20 385 CV < 1.5%
15 μm 0.5 60 14.5 590 輕微多分散
10 μm 0.5 65 9.5 910 CV < 3%
參數觀察: 隨噴嘴尺寸縮小,液滴粒徑同步下降,而生成頻率則明顯提升。若目標為 10–15 μm 小粒徑液滴,建議優先觀察液滴均一性與流量穩定性,並搭配顯微鏡即時微調參數。

Fluidic 947 詳細參數地圖

Fluidic 947 晶片適用於小粒徑液滴生成,包含 10、15、20 與 30 μm 等不同噴嘴尺寸。以下參數地圖可協助研究人員依目標液滴粒徑、生成頻率與均一性需求,選擇合適的水相與油相流量組合。
Fluidic 947 30 μm 噴嘴參數表

Design #7–#8|30 μm nozzle(CV < 1.5%)

Fluidic 947 20 μm 噴嘴參數表

Design #5–#6|20 μm nozzle(CV < 1.5%)

Fluidic 947 10 μm 噴嘴參數表

Design #1–#2|10 μm nozzle(CV < 3%)

Fluidic 947 15 μm 噴嘴參數表

Design #3–#4|15 μm nozzle(CV < 2%)

使用建議: 點擊圖片可開啟大圖查看詳細參數。若追求較高均一性,可優先參考 20 μm 與 30 μm 噴嘴條件;若需建立 10–15 μm 小粒徑液滴,建議同步觀察液滴穩定性與是否出現多分散現象,再逐步微調油相與水相流量。
03

常見問題排除與解決方法

實驗過程中常見的異常包含氣泡、阻塞、連接滲漏與參數設定不當。以下整理常見現象、可能原因與對應解法,建議依優先順序逐步排查,提升問題處理效率。

01

流量感測器讀數忽高忽低,並逐漸恢復

可能原因

系統內有氣泡,氣泡通過感測器時無法被準確偵測。

解決方法
  1. 保持壓力與流量穩定,讓氣泡隨流體排出。
  2. 實驗前充分排泡。
  3. 試劑建議先過濾並脫氣。
02

流量無法穩定,始終偏離設定值

可能原因

流體阻力元件未正確安裝、PI 參數設定不當,或系統出現滲漏。

解決方法
  1. 確認流體阻力元件是否安裝於感測器下游。
  2. 降低 P 值以提升流量穩定性,PI 參數可先維持 P = 0.01、I = 0.005。
  3. 檢查所有接頭是否密封,並修復滲漏點。
03

晶片內只有單一相流體進入

可能原因

感測器接反、通道壓力不足,或管路出現滲漏。

解決方法
  1. 確認感測器出口方向與流體流向是否正確。
  2. 提高未進入晶片相別的壓力或流量。
  3. 檢查管路是否有斷裂、鬆脫或滲漏。
04

晶片阻塞,液滴停止生成

可能原因

試劑未過濾、含有顆粒雜質,或氣泡卡在噴嘴位置。

解決方法
  1. 提高兩相壓力,嘗試將雜質或氣泡沖出。
  2. 若仍無法排除,建議更換晶片。
  3. 後續試劑需以 0.22 μm 濾膜過濾,避免顆粒進入晶片。
05

OB1 控制器噪音過大

可能原因

系統供氣不穩、流體管路洩漏,或壓力轉換件鬆動。

解決方法
  1. 檢查外部氣源是否穩定。
  2. 檢查流體接頭與氣動接頭是否確實密封。
  3. 確認轉接件固定狀態,並修復滲漏點。
04

常見問題(FAQ)

Q1:能否透過切換油相/水相入口,生成水包油(O/W)液滴?
不能。本方案使用的 MCS 晶片為 Topas 疏水材質,主要適用於油包水(W/O)液滴生成。若需生成水包油(O/W)液滴,需使用親水材質晶片(如玻璃晶片),或洽詢 MCS 進行客製化配置。
Q2:如何優化 10–15 μm 小粒徑液滴生成?
可將油相 MFS-2+ 感測器更換為 MFS-3+ 感測器,並搭配 23-1 流體阻力元件(41 cm,175 μm 內徑)。此配置可將油相流量範圍提升至 25–500 μL/min,進一步放大油相/水相流量比例,實現 10–15 μm 液滴的單分散穩定生成(CV < 3%)。實測條件可參考:10 μm 噴嘴,水相 0.5 μL/min,油相 65 μL/min,粒徑 9.5 μm,生成頻率 910 Hz。
Q3:如何提升流量控制的響應速度?
建議先以基礎 PI 參數(P = 0.01,I = 0.005)確保系統穩定性。若響應速度偏慢,可小幅提高 P 值,例如調整至 P = 0.02、I = 0.01,以提升流量控制反應速度。不過,調整後仍需透過顯微鏡即時觀察液滴狀態,避免因響應過快導致粒徑波動。
Q4:如何適配非標準試劑或油相?
若實驗使用非 HFE-7500 油相,建議重新校正流量感測器。可依照 MFS 感測器官方校正流程,以實驗用油相作為標準液體,完成校正後設定比例因子與偏移量,確保流量檢測精準。同時,也需依表面活性劑類型與濃度,選擇合適的油相體系。
05

方案總結

宏虹 Elveflow × Microfluidic ChipShop 微流控液滴生成方案,是一套兼具標準化、高性價比與易上手特性的液滴生成解決方案。透過精準的壓力/流量控制與專用晶片的完整搭配,研究人員可穩定實現 10–80 μm 油包水(W/O)液滴的高均一性生成。即使不具備微流控專業背景,也能依循標準化流程快速完成實驗建置。

此外,系統支援彈性的參數優化與配件升級,可依據不同實驗需求調整條件,適配小粒徑、高通量、非標準試劑等多元應用,是生物醫學、材料科學與高通量篩選等研究領域中,建立穩定液滴生成流程的理想工具。

標準化導入

依循固定流程完成建置、校正、液滴生成與清潔維護。

高均一性生成

支援 10–80 μm 油包水液滴生成,滿足不同粒徑需求。

彈性實驗調整

可依試劑、流量、頻率與晶片條件進行參數優化。

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